Bệnh chân và miệng virus-O kháng thể elisa

Đặc điểm kỹ thuật

FMDV-O AB ELISA

Dự định sử dụng: Virus bệnh chân và miệng của Bovine-O

Bộ phát hiện ELISA kháng thể là để xác định kháng thể chân và miệng trong huyết thanh của bò trong ống nghiệm. Xét nghiệm này được sử dụng để đánh giá virus bệnh và bệnh virus loại O Tình trạng miễn dịch kháng thể của các trang trại.

Mẫu vật: huyết thanh

Vật liệu cần thiết nhưng không được cung cấp:

Nước tinh khiết

Pipettor

96- Đầu đọc vi bản (450nm)

Hẹn giờ

Ly tâm (4000 vòng / phút)

Máy giặt

Lò nướng (37 độ)

Thủ tục kiểm tra & giải thích

Bước 1 Quy trình kiểm tra

1.1 Chuẩn bị dung dịch rửa

WNồng độ orking wChất lỏng As Breath:Trước khi sử dụng, dung dịch rửa phải được khôi phục về nhiệt độ phòng (20-25 độ) và lắc đều để làm cho nó đồng nhất. Sau đó pha loãng 20 lần dung dịch rửa cô đặc với nước tinh khiết (ví dụ, dung dịch rửa cô đặc 5ml được thêm vào nước tinh khiết 95mL), trộn đều và chất lỏng rửa pha loãng có thể được lưu trữ ở 2-8 độ trong 7 ngày.

1.2 Chuẩn bị mẫu

Toàn bộ máu động vật đã được lấy, ly tâm ở 4000 vòng / phút trong 10 phút và phần nổi phía trên được thu thập. Huyết thanh cũng có thể được đông lại tự nhiên mà không bị tán huyết.

Pha loãng Mẫu huyết thanh 1:25 (thêm mẫu huyết thanh 5UL vào chất pha loãng mẫu 120ul) và trộn kỹ.

Lưu ý: Kiểm soát tiêu cực và tích cực cũng cần loãng.

1.3 Chuẩn bị liên hợp enzyme

Pha loãng liên hợp enzyme 1:90 (thêm 5ul liên hợp enzyme (X100) vào 445ul chất pha loãng mẫu) và trộn kỹ.

1.4 Quy trình kiểm tra

① Đã có thể được tháo rời và sử dụng nhiều lần), theo số lượng mẫu và kiểm soát tích cực với phản ứng tương ứng. Nhẹ nhàng lắc mẫu trong giếng, sử dụng màng tấm niêm phong để che tấm, và ủ ở 37 độ trong 30 phút.

Mở ra màng tấm niêm phong, làm rung chuyển dung dịch trong tấm, thêm 300 Laul chất lỏng rửa nồng độ làm việc cho mỗi giếng, và sau đó loại bỏ chất lỏng trong giếng. Lặp lại các bước trên 5 lần, và cuối cùng vỗ khô trên một tờ giấy hấp thụ sạch.

③ADD 100LE của enzyme liên hợp với mỗi giếng, bao gồm tấm và ủ ở 37 độ trong 45 phút.

Mở ra màng tấm niêm phong, làm rung chuyển dung dịch trong tấm, thêm 300 Laul chất lỏng rửa nồng độ làm việc cho mỗi giếng, và sau đó loại bỏ chất lỏng trong giếng. Lặp lại các bước trên 5 lần, và cuối cùng vỗ khô trên một tờ giấy hấp thụ sạch.

Dung dịch chất nền 100 ADD cho mỗi giếng, che tấm và ủ trong 10 phút ở mức 37 độ so với ánh sáng.

⑥ADD 50 Dung dịch Dừng cho mỗi giếng và xác định kết quả trong vòng 5 phút.

Bước 2 Giải thích kết quả

Giá trị OD450 của mỗi giếng đã được đọc trên 96- đầu đọc vi bản.

2.1 Xác thực

Giá trị OD450Nm trung bình của kiểm soát âm là<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Phương pháp tính toán

Đối với mỗi mẫu, tính toán S/P như sau bằng cách sử dụng các giá trị mẫu và điều khiển đã sửa:

2.3 Giải thích kết quả

Khi s/p<0.15, it is judged as negative.

Khi S/P lớn hơn hoặc bằng 0. 25, nó được đánh giá là dương.

Khi 0. 15 nhỏ hơn hoặc bằng s/p<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Chú phổ biến: Bệnh và miệng virus-O kháng thể ELISA Kit, China Foot and Mouth Dia