Bộ phát hiện kháng thể ELISA viêm mũi khí quản truyền nhiễm ở bò

Mẫu số:VD105E
Tên viết tắt:IBRV Ab Elisa
Mẫu vật: huyết thanh

Mô tả

Đặc điểm kỹ thuật

BVDV Kháng thể Elisa

Mục đích sử dụng: truyền nhiễmVirus viêm mũi khí quản bòBộ phát hiện ELISA kháng thể được sử dụng đểxác định bệnh viêm mũi khí quản truyền nhiễmkháng thể virus trong huyết thanh bò in vitro.

Mẫu vật: huyết thanh

Vật liệu được cung cấp:

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

Quy trình kiểm tra & Giải thích

BƯỚC 1 Quy trình kiểm tra

1.1 Chuẩn bị dung dịch rửa

Wnồng độ orking wchất lỏng tro hóa:Trước khi sử dụng, dung dịch rửa phải được khôi phục về nhiệt độ phòng (20-25 độ) và lắc đều để đồng nhất. Sau đó pha loãng 20 lần dung dịch rửa đậm đặc với nước tinh khiết (ví dụ: 5ml dung dịch rửa đậm đặc được thêm vào 95ml nước tinh khiết), trộn đều và nước giặt đã pha loãng có thể bảo quản ở nhiệt độ 2-8 độ trong 7 ngày.

1.2 Chuẩn bị mẫu

① Lấy toàn bộ máu động vật, ly tâm ở tốc độ 4000 vòng/phút trong 10 phút và thu lấy phần nổi phía trên. Huyết thanh cũng có thể được đông tụ một cách tự nhiên mà không bị tan máu.

② Pha loãng huyết thanh cần xét nghiệm 50 lần trong đĩa pha loãng huyết thanh (ví dụ: thêm 3ul huyết thanh cần xét nghiệm vào dung dịch pha loãng mẫu 147ul).

Lưu ý: Không cần pha loãng chất đối chứng âm tính và dương tính

1.3 Quy trình kiểm tra

①Lấy nhãn enzyme Microplate (theo số lượng mẫu, có thể tháo rời và sử dụng nhiều lần), thêm 100ul huyết thanh đã pha loãng vào nhãn enzyme Microplate, đặt hai giếng cho mỗi giếng đối chứng âm và đối chứng dương, và thêm 100ul vào giếng phản ứng tương ứng. Lắc nhẹ mẫu trong giếng, dùng màng bọc kín đậy kín đĩa và ủ ở 37 độ trong 30 phút.

②Mở màng tấm niêm phong, lắc sạch dung dịch trong giếng, thêm 300µl dung dịch rửa nồng độ làm việc vào từng giếng, sau đó loại bỏ chất lỏng trong giếng. Lặp lại các bước trên 5 lần và cuối cùng lau khô trên giấy thấm sạch.

③Chất liên hợp enzyme pha loãng: Pha loãng chất liên hợp enzyme (80×) 80 lần (ví dụ: chất pha loãng mẫu liên hợp 10ul + 790ul, lượng cụ thể cần thiết được tính theo số lượng mẫu thử), trộn đều và đặt sang một bên.

④Thêm 100µl Enzyme Conjugate vào mỗi giếng, đậy nắp đĩa và ủ ở 37 độ trong 30 phút.

⑤Rửa tấm enzyme, thao tác cụ thể tương tự như trên ②.

⑥Thêm 100µl dung dịch cơ chất vào mỗi giếng, đậy đĩa lại và ủ trong 10 phút ở nhiệt độ 37 độ, tránh ánh sáng.

BƯỚC 2 Giải thích kết quả

Giá trị OD450 của mỗi giếng được đọc trên máy đọc đĩa vi thể 96 giếng.

2.1 Xác thực Giá trị OD450nm trung bình của đối chứng âm là < 0,25 và giá trị OD450nm trung bình của đối chứng dương là Lớn hơn hoặc bằng 0,6, kết quả thử nghiệm là hợp lệ. Nếu không, thử nghiệm nên được lặp lại.

2.2 Phương pháp tính toán

Đối với mỗi mẫu, tính S/P như sau bằng cách sử dụng các giá trị mẫu và đối chứng đã hiệu chỉnh:

product-554-49